mlst

Tags: typing mlst sequence-type alleles pubmlst bactopia-tool

Chamada automática de Multi-Locus tipo de sequencia (MLST) a partir de contigs montados.

Esta Ferramenta Bactopia utiliza o mlst para varrer montagens de genomas e determinar o tipo de sequencia com base nos esquemas do PubMLST. O fluxo de trabalho detecta automaticamente o esquema MLST adequado para cada organismo e fornece atribuições de tipo de sequencia padronizadas.

Uso

Bactopia CLI:

bactopia --wf mlst \
  --bactopia /path/to/your/bactopia/results

Nextflow:

nextflow run bactopia/bactopia/workflows/bactopia-tools/mlst/main.nf \
  --bactopia /path/to/your/bactopia/results

Saídas

Arquivos de Saída Esperados

<BACTOPIA_DIR>
├── <SAMPLE_NAME>
│   └── tools
│       └── mlst-<TIMESTAMP>
│           ├── <SAMPLE_NAME>.tsv
│           └── logs
│               ├── nf.command.{begin,err,log,out,run,sh,trace}
│               └── versions.yml
└── bactopia-runs
    └── mlst-<TIMESTAMP>
        ├── merged-results
        │   ├── logs
        │   │   └── mlst-concat
        │   │       ├── nf.command.{begin,err,log,out,run,sh,trace}
        │   │       └── versions.yml
        │   └── mlst.tsv
        └── nf-reports
            ├── mlst-dag.dot
            ├── mlst-report.html
            └── mlst-timeline.html

Resultados por Amostra

Arquivo	Descrição
*.tsv	Arquivo delimitado por tabulação com os resultados do MLST, incluindo esquema, ST e perfis de alelos

Resultados Combinados

Arquivo	Descrição
mlst.tsv	Arquivo TSV combinado contendo os resultados do MLST de todas as amostras

Trilha de Auditoria

A seguir estão os arquivos que podem ajudar você a entender quais parâmetros e versões de programas foram utilizados.

Logs

Cada processo executado terá uma pasta chamada logs. Nessa pasta estão arquivos úteis para consulta caso necessário.

Extensão	Descrição
.begin	Um arquivo vazio usado para indicar que o processo foi iniciado
.err	Contém as saídas STDERR do processo
.log	Contém as saídas STDERR e STDOUT do processo
.out	Contém as saídas STDOUT do processo
.run	O script que o Nextflow usa para preparar/desmontar arquivos e enfileirar processos com base no perfil definido
.sh	O script executado pelo bash para o processo
.trace	O relatório de rastreamento do Nextflow para o processo
versions.yml	Um arquivo no formato YAML com as versões dos programas

Relatórios do Nextflow

Esses relatórios do Nextflow fornecem um excelente resumo da sua execução. Podem ser usados para otimizar o uso de recursos e estimar custos esperados ao utilizar plataformas em nuvem.

Nome do Arquivo	Descrição
mlst-dag.dot	A visualização DAG do Nextflow
mlst-report.html	O Relatório de Execução do Nextflow
mlst-timeline.html	O Relatório de Linha do Tempo do Nextflow
mlst-trace.txt	O relatório de Rastreamento do Nextflow

Parâmetros

Parâmetros Obrigatórios

Define onde o pipeline deve encontrar os dados de entrada e salvar os dados de saída.

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--bactopia	string		O caminho para os resultados do bactopia a serem usados como entradas

Parâmetros do MLST

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--mlst_scheme	string		Não detectar automaticamente; forçar este esquema em todas as entradas
--mlst_minid	integer	95	Percentual mínimo de identidade de DNA do alelo completo para ser considerado 'similar'
--mlst_mincov	integer	10	Percentual mínimo de cobertura de DNA para reportar alelo parcial
--mlst_minscore	integer	50	Pontuação mínima de 100 para corresponder a um esquema
--mlst_nopath	boolean	false	Remover caminhos de nome de arquivo da coluna FILE
--mlst_db	string		Um banco de dados MLST personalizado a ser utilizado, como um arquivo compactado ou diretório

Parâmetros do csvtk concat

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--csvtk_concat_opts	string		Opções extras do csvtk concat entre aspas

Parâmetros de Filtragem

Use estes parâmetros para especificar quais amostras incluir ou excluir.

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--include	string		Um arquivo de texto contendo nomes de amostras (um por linha) a serem incluídas na análise
--exclude	string		Um arquivo de texto contendo nomes de amostras (um por linha) a serem excluídas da análise

Parâmetros Opcionais

Estes parâmetros opcionais podem ser úteis em determinadas situações.

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--outdir	string	bactopia	Diretório base para salvar os resultados
--skip_compression	boolean	false	Os arquivos de saída não serão comprimidos
--datasets	string		O caminho para armazenar em cache os datasets
--keep_all_files	boolean	false	Mantém todos os arquivos de análise criados

Parâmetros de Limite Máximo de Recursos

Define o limite máximo de recursos solicitados para qualquer processo individual.

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--max_retry	integer	3	Número máximo de tentativas de um processo antes de permitir que ele falhe.
--max_cpus	integer	4	Número máximo de CPUs que podem ser solicitadas para qualquer processo individual.
--max_memory	string	128.GB	Quantidade máxima de memória que pode ser solicitada para qualquer processo individual.
--max_time	string	240.h	Tempo máximo que pode ser solicitado para qualquer processo individual.
--max_downloads	integer	3	Número máximo de amostras a serem baixadas simultaneamente

Parâmetros de Configuração do Nextflow

Parâmetros para ajustar a configuração do seu Nextflow.

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--nfconfig	string		Um arquivo de configuração compatível com Nextflow para perfis personalizados, carregado por último e que substituirá variáveis existentes se definido.
--publish_dir_mode	string	copy	Método utilizado para salvar os resultados do pipeline no diretório de saída. (opções: symlink, rellink, link, copy, copyNoFollow, move)
--infodir	string	${params.outdir}/pipeline_info	Diretório para armazenar logs e relatórios do Nextflow do pipeline.
--force	boolean	false	O Nextflow irá sobrescrever arquivos de saída existentes.
--cleanup_workdir	boolean	false	Após a execução bem-sucedida do Bactopia, o diretório work será excluído.

Opções de configuração institucional

Parâmetros usados para descrever perfis de configuração centralizados. Estes não devem ser editados.

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--custom_config_version	string	master	ID de commit Git para configurações institucionais.
--custom_config_base	string	https://raw.githubusercontent.com/nf-core/configs/master	Diretório base para configurações institucionais.
--config_profile_name	string		Nome do perfil de configuração institucional.
--config_profile_description	string		Descrição do perfil de configuração institucional.
--config_profile_contact	string		Informações de contato do perfil de configuração institucional.
--config_profile_url	string		Link de URL do perfil de configuração institucional.

Parâmetros de Perfil do Nextflow

Parâmetros para ajustar a configuração do seu Nextflow.

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--condadir	string		Diretório que o Nextflow deve usar para ambientes Conda
--registry	string	quay.io	Registro do qual os contêineres Docker serão baixados.
--datasets_cache	string	<HOME>/.bactopia/datasets	Diretório onde os datasets baixados devem ser armazenados.
--singularity_cache	string		Diretório onde as imagens Singularity remotas são armazenadas.
--singularity_pull_docker_container	boolean		Em vez de baixar diretamente imagens Singularity, força o fluxo de trabalho a baixar e converter contêineres Docker.
--force_rebuild	boolean	false	Forçar a substituição de ambientes pré-construídos existentes.
--queue	string	general,high-memory	Nome(s) da(s) fila(s) separados por vírgula a serem usados por um agendador de tarefas (ex.: AWS Batch ou SLURM)
--cluster_opts	string		Opções adicionais a serem passadas ao executor. (ex.: SLURM: '--account=my_acct_name'
--container_opts	string		Opções adicionais a serem passadas ao Apptainer, Docker ou Singularity. (ex.: Singularity: '-D pwd'
--disable_scratch	boolean	false	Todos os arquivos intermediários criados nos nós de trabalho serão transferidos para o nó principal.

Parâmetros Úteis

Parâmetros raramente utilizados que podem ser úteis.

Parâmetro	Tipo	Padrão	Descrição
--monochrome_logs	boolean		Não usar saídas de log coloridas.
--nfdir	boolean		Exibir o diretório para o qual o Nextflow baixou o Bactopia
--sleep_time	integer	5	O tempo (em segundos) que o Nextflow aguardará após configurar os datasets antes da execução.
--validate_params	boolean	true	Define se os parâmetros devem ser validados em relação ao esquema em tempo de execução
--help	boolean		Exibir texto de ajuda.
--wf	string	bactopia	Especificar qual fluxo de trabalho ou Ferramenta Bactopia executar
--list_wfs	boolean		Listar os fluxos de trabalho e Ferramentas Bactopia disponíveis para uso com '--wf'
--show_hidden_params	boolean		Mostrar todos os parâmetros ao usar --help
--help_all	boolean		Um alias para --help --show_hidden_params
--version	boolean		Exibir texto da versão.

Composição

Este fluxo de trabalho utiliza os seguintes subworkflows:

• mlst - Determinar tipos de sequencia multilocus (MLST) a partir de montagens bacterianas.

Citações

Se você usar este fluxo de trabalho em sua análise, por favor cite o seguinte.

• Bactopia
  Petit III RA, Read TD Bactopia - a flexible pipeline for complete analysis of bacterial genomes. mSystems 5 (2020)

• csvtk
  Shen, W csvtk: A cross-platform, efficient and practical CSV/TSV toolkit in Golang. (GitHub)

• mlst
  Seemann T mlst: scan contig files against PubMLST typing schemes (GitHub)

• PubMLST.org
  Jolley KA, Bray JE, Maiden MCJ Open-access bacterial population genomics: BIGSdb software, the PubMLST.org website and their applications. Wellcome Open Res 3, 124 (2018)

Fonte

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